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 　　梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴(kuò)增儀。PCR反應(yīng)能否成功，退火溫度是關(guān)鍵，它每個(gè)孔的溫度可以在范圍內(nèi)按照梯度設(shè)置，根據(jù)結(jié)果，一步就可以摸索出適反應(yīng)條件。一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之為梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同的DNA片段其適合的退火溫度不同，通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增，這樣可節(jié)省試驗(yàn)時(shí)間、提高實(shí)驗(yàn)效率，又節(jié)約實(shí)驗(yàn)成本。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用。

　　PCR技術(shù)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，目前市場上常見的有：普通PCR儀、梯度PCR儀、原位PCR儀、熒光定量PCR儀(qPCR)以及數(shù)字PCR儀(dPCR)等。而使用多是梯度PCR儀和熒光定量PCR儀，生產(chǎn)PCR儀廠家也是不勝枚舉。
 

　　小編將就如何選購一臺合適的梯度PCR儀作以下介紹，供大家參考。

　　精準(zhǔn)的溫度控制系統(tǒng)

　　對PCR儀來說，溫度控制指標(biāo)主要是指溫度的準(zhǔn)確性、均一性、以及升降溫速度。

　　溫度的準(zhǔn)確性：是指樣品孔溫度與設(shè)定溫度的一致性，它直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。由于PCR是一個(gè)幾何級數(shù)擴(kuò)增的過程，不論是變性、退火還是延伸都需要準(zhǔn)確控制溫度，對退火溫度而言溫控顯的尤為重要，有時(shí)1°甚0.5°的差異也能決定實(shí)驗(yàn)的成功與失敗，所謂差之毫厘，謬之千里。因而對PCR擴(kuò)增儀而言溫度控制就意味著質(zhì)量。

　　溫度的均一性：是指樣品孔間的溫度差異，它關(guān)系到在不同樣品孔進(jìn)行反應(yīng)結(jié)果的一致性。有用戶發(fā)現(xiàn)用同樣的樣品，同樣的PCR反應(yīng)程序，后的結(jié)果竟然差異非常明顯，或許就是因?yàn)椴煌恢玫臏囟炔痪鶆蛩?。同時(shí)位置邊緣效應(yīng)對PCR實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性影響非常明顯。

　　升降溫速率：更快的升降溫速度，可以縮短反應(yīng)進(jìn)行的時(shí)間，而且縮短了可能的非特異性結(jié)合、反應(yīng)的時(shí)間，能提高PCR反應(yīng)的特異性。2.2 儀器的功能性和人性化設(shè)計(jì)，越友好的操作界面、完善的功能以及人性化的設(shè)計(jì)更能吸引用戶。(熱蓋、樣品座、軟件)

　　熱蓋：現(xiàn)在的PCR儀一般均配備熱蓋，熱蓋溫度設(shè)為105℃，使樣品管頂部的溫度達(dá)到105℃左右，蒸發(fā)的反應(yīng)液就不會產(chǎn)生凝集在管蓋上而改變反應(yīng)體積，這樣用戶就無需再向反應(yīng)管內(nèi)加石蠟油，直接減少后繼反應(yīng)的麻煩。

　　樣品座：PCR反應(yīng)多在0.2或者0.5的管子中進(jìn)行，多數(shù)PCR儀也配備了不同的可更換樣品槽適配不同的樣品管。

　　軟件：新的PCR儀都比較注重程序編寫的簡易性。大屏幕，顯示實(shí)時(shí)信息，倒計(jì)時(shí)，記憶存儲多個(gè)程序、自動斷電保護(hù)等都有助于實(shí)驗(yàn)室中的復(fù)雜環(huán)境使用。

　　隨著生物技術(shù)的發(fā)展，PCR儀已經(jīng)發(fā)展為實(shí)驗(yàn)室通用儀器，因此生產(chǎn)廠家也是如雨后春筍般層出不窮，光是比較參數(shù)，就夠累了。況且PCR儀還是實(shí)驗(yàn)室中的老黃牛，幾乎24小時(shí)運(yùn)轉(zhuǎn)，買臺可靠的儀器尤為重要。

　　建議在選購PCR儀時(shí)，除溫度、功能、人性化設(shè)計(jì)外，還需要注意價(jià)格、使用壽命、售后服務(wù)、機(jī)器噪音、品牌的度等。